CONTAJE DE RETICULOCITOS 27/11/2014
Material necesario
- Microscopio.
- Tubos de hemólisis.
- Pipetas
Pasteur.
- Portas.
- Baño de
agua.
- Sistema de
filtración.
Reactivos
- Azul de
cresil brillante en polvo.
- Solución
salina al 0.9%.
- Citrato
sódico al 3%
- Agua
destilada.
- Aceite de
inmersión.
Muestra
Sangre anticoagulada con EDTA.
Debido a que los reticulocitos también maduran in Vitro, es aconsejable
que la sangre utilizada se haya extraído recientemente, como máximo 6 horas
antes de su análisis.
Técnica
- Preparación
del colorante:
Mezclamos 80ml de solución salina y 20ml
de citrato sódico al3%.
Pesamos 1g de azul de cresil brillante y
lo disolvemos en la mezcla anterior.
Filtramos antes de usarlo
- Tinción de
los reticulocitos:
Es una tinción supravital, es decir, se
hace mientras las células aún están vivas.
Para ello, echamos 3 gotas de la solución
colorante en un tubo de hemólisis y otras 3 gotas de sangre total previamente
homogeneizda.
Mezclamos suavemente y tapamos con papel
parafilm®. Introducimos en el baño de agua a 37ºC durante 5 minutos.
Realizamos una extensión y dejamos secar
al aire.
Lectura de resultados.
Observamos la extensión con el objetivo de 100x.
Los hematíes se habrán teñido de color
verde amarillento y los reticulocitos se diferencian porque presentan en su
interior unos hilos finos de color azul.
Se deben contar 2.000 hematíes en total,
y el cálculo del porcentaje de reticulocitos es el siguiente:
% reticulocitos = Nº de reticulocitos
contados / Nº de hematíes contados x 100
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS
OBTENIDOS.
En
adultos y niños los valores normales están entre 0,5 y 1,5%.
Se
produce reticulopenia o disminución en la cifra de reticulocitos, en casos de
aplasia medular, anemia ferropénica, anemia megaloblástica y anemias que cursan
con dificultad en la eritropoyesis.
La
cantidad de reticulocitos expresada en tanto por ciento es un valor relativo
referido a una cifra normal de hematíes.
La
corrección se hace en base al valor hematocrito (HCT) del paciente, y se
calcula de la siguiente forma:
%
de reticulocitos corregido = % reticulocitos x HCT. Paciente/ HCT. Normal.
Si
existe una anemia muy intensa, aparece en sangre periférica un número de reticulocitos
mayor del que correspondería por regeneración eritroblástica.
Se
obtiene con la siguiente fórmula:
IPR
= % reticulocitos corregido/ días de maduración en sangre periférica
Los
días que tarde en madurar el reticulocitos están reflejados en la tabla
6.XVI-1., cuyos valores se han obtenido experimentalmente.
Un IPR mayor de 3 nos indica un aumento de la actividad
eritropoyética medular, mientras que un IPR menor de 2 indica una escasa
actividad eritropoyética.
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