viernes, 12 de diciembre de 2014

RECUENTO DE HEMATÍES


Material necesario

  • Una pipeta diluidota de Thoma, para recuento de glóbulos rojos.
  • Un tubo de goma con boquilla, adaptable a la pipeta deluidora.
  • Una cámara de recuento, con un retículo tipo Neubauer mejorado.
  • Un cubre (hay unos cubres especiales para su uso en recuentos con cámara).
  • Un microscopio.

Reactivos

  • Líquido de dilución. Éste debe ser isotónico con el plasma, para evitar la alteración morfológica e incluso la lisis de los hematíes.
El más utilizado es el de Hayem, que se compone de las siguientes sustancias:
      - 2,5 g de sulfato sódico.
      - 0,5 g de cloruro sódico.
      - 0,25 g de cloruro mercúrico.
      - 100 ml de agua destilada.
Si contiene precipitados, antes de usarlo deberá ser filtrado.

Muestra

  • Sangre capilar obtenida por punción del pulpejo de un dedo o sangre venosa procedente de una punción venosa y anticoagulada con EDTA.

Técnica

  1. Situar un cubre sobre el retículo de la cámara. Para facilitar su adhesión se ejerce una ligera presión al tiempo que se desliza el cubre sobre las bandas laterales.
  2. Aspirar la sangre hasta la señal de 0,5 o hasta la de 1.
En el caso de que se sobrepase algo el enrase, se hace descender la columna de sangre tocando la punta de la pipeta con un algodón.

  1. Limpiar cuidadosamente el exterior de la pipeta con un algodón y sin hacer bajar el nivel de sangre.
  2. Aspirar líquido diluyente hasta la señal 101.
  3. Desenganchar el tubo de goma de la pipeta y homogeneizar el contenido del bulbo. 
  4. Desechar las 3 primeras gotas emitidas por la pipeta. 
  5. Depositar la siguiente gota entre la cámara y el cubre. 
  6. Dejar reposar la sangre diluida, contenida en la cámara, durante unos minutos, para que las células presentes en ella puedan sedimentarse.
  7. Enforcar el retículo con el objetivo de 40x y con el condensador a baja altura, y verificar que la distribución de los hematíes es homogénea.
  8. Contar los hematíes presentes en 80 cuadrados pequeños del cuadrado grande central. Esto se logra, por ejemplo, contando los hematíes que hay en los 4 cuadrados medianos de las esquinas y en el del centro.

Lectura de resultados

Como se cuentan los hematíes presentes en 5 cuadrados medianos del cuadrado grande central, y éste tiene 25 cuadrados medianos, hay que multiplicar por 5 la cifra obtenida en el recuento, para calcular el número de hematíes que hay en un cuadrado grande.
En definitiva, para su cálculo puede emplearse la siguiente fórmula:

RBC = H x 5 x 10 x D.

RBC= recuento de hematíes (número de hematíes por mm³ de sangre)
H= hematíes contados en 5 cuadrados medianos
D= factor de dilución (100 ó 200)
El margen de error de esta técnica es alto ( un ± 20%)

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS

La disminución del RBC se produce en las anemias y su aumento se da en las policitemias.
Se considera normal un RBC comprendido entre los 4 y los 5,5 millones/mm³ en las mujeres, y entre los 4,5 y los 6 millones/mm³ en los varones.

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