Tinción azul de metileno 7/11/2014

Fundamento

En esta tinción supravital utilizaremos como colorante el azul del metileno nuevo. Éste es de carácter básico y tiñe fundamentalmente los núcleos celulares.

Material necesario.

Ø      Microscopio óptico

Ø      Portas y cubres

Ø      Tubos de hemólisis.

Ø      Pipetas Pasteur.

Ø      Laca de uñas o sellador histológico

Ø      .

Ø      Papel parafilm.

Reactivos

Ø      Azul de metileno nuevo.

Ø      Oxalato.

Ø      Agua destilada.

Muestra

Sangre capilar fresca o venosa anticoagulada.

Técnica

1. Preparamos el colorante de la siguiente manera:

Azul de metileno nuevo   0,5 g.

Oxalato potásico              1,6 g.

Agua destilada c.s.p         100 ml.

2. En una porta depositamos 2 gotas de sangre y 2 gotas de colorante (proporción 1:1) y, seguidamente, aspiramos la mezcla con una pipeta Pasteur y la depositamos en tubo de hemólisis. También se puede preparar directamente la mezcla en el tubo.

3. Tapamos el tubo con parafilm y dejamos la mezcla en reposo, a temperatura ambiente, durante 10 minutos.

4.      Al cabo de este tiempo aspiramos una o dos gotas de la mezcla y la depositamos sobre un portaobjetos.

5. Cubrimos la mezcla con un cubreobjetos y, si es preciso, sellamos los bordes cubreobjetos con laca de uñas o con un sellador histológico

6. Observamos la preparación resultante al microscopio óptico con el objetivo de 40 x.

Lectura de resultados

La observación microscópica debe ser rápida, ya que las células no permanecen vivas mucho tiempo. Podemos apreciar los núcleos celulares teñidos en comparación con la preparación obtenida en la práctica nº III.