DETERMINACIÓN SÉRICA DEL GRUPO ABO 24/4/2015

Fundamento

El suero de un individuo sólo debe contener anticuerpos frente a los antígenos que no están presentes en sus propios hematíes- Por ello, al hacer reaccionar este suero con hematíes conocidos del grupo A y del grupo B, sólo producirá aglutinación en el caso de ser enfrentado a eritrocitos con antígenos distintos a los de sus propios hematíes.

Material necesario

·         Tubos de centrifuga.

·         Pipetas Pasteur.

·         Baño de agua.

·         Centrifuga.

·         Reloj.

·         Rotulador de vidrio.

·         Gradilla.

Reactivos

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·         Hematíes del grupo A1.

·         Hematíes del grupo A2.

·         Hematíes del grupo B.

·         Hematíes del grupo 0.

·         Hematíes de la sangre problema.

Muestra

·         Suero obtenido mediante coagulación de la sangre en baño de agua a 37°C durante 20 a 30 minutos.

Técnica

1.       Para evitar falsos negativos por la presencia de complemento activo en el suero, es aconsejable la inactivación previa de la muestra. Esto se realiza manteniendo el suero en un baño de agua a 56°C durante 10 minutos. Con esto evitamos los fenómenos de hemólisis debidos al complemento.

2.       Lavamos tres veces los hematíes propios de la sangre problema con solución salina isotónica.

3.       Rotulamos un tubo de centrífuga con la letra A1, otro con la letra A2, otro B, otro 0 y otro C.

4.       Añadimos a cada tubo dos gotas del suero problema inactivado.

5.       Depositamos una gota de la suspensión de hematíes que se corresponda con la letra del tubo rotulado. En el tubo C añadimos una gota de la suspensión de los hematíes propis de la sangre problema, ya que nos servirá de control negativo.

6.       Agitamos suavemente y centrifugamos a 1.000 r.p.m durante 1 minuto.

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS

El grupo eritrocitario que se asignará, atendiendo a los resultados obtenidos, se puede ver en el siguiente cuadro:

Tubo A1	Tubo A2	Tubo B	Tubo 0	Tubo C	Ac presentes en el suero	Grupo eritrocitario
-	-	+	-	-	Anti-B	A1
- o +*	-	+	-	-	Anti-B y anti-A1*	A2
+	+	-	-	-	Anti-A	B
+	+	+	-	-	Anti-A y anti-B	0
-	-	-	-	-	Ninguno	A1B
- o +*	-	-	-	-	Ninguno o Anti-A1	A2B
+	+	+	+	+	Autoanticuerpos	Ininterpretable

+ = Aglutinación

˗ = No aglutinación

* = Este anti-A1 se encuentra sólo en un 2% de los individuos A2.

Ó = Este resultado se observa sólo en el 25% de los individuos A2B.

Hoja de Trabajo

1º ¿Qué son los hematíes tipados? Hematies lavados con suero fisiologico

2º ¿A qué dilución empleamos los hematíes del paciente? Al 5%

3º ¿Qué clase de muestra se emplea en esta técnica? Suero obtenido mediante coagulación

4º ¿Qué ocurre cuando el tubo C presenta aglutinación? Se repite la prueba